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点击次数:80 发布时间:2019-03-22
   液相色谱柱系统由储液器、泵、进样器、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入液相色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。
  什么情况下会造成液相色谱柱柱压过高
  液相色谱柱的柱压高,首先想到的是堵,一是考虑的是仪器管路问题,二是考虑的是色谱柱问题,逐一进行排除:
  1.拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
  2.把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降正常,则是色谱柱堵塞问题;
  3.针对色谱柱缓冲液盐分沉积于柱内堵塞;建议把柱子好好冲一次,用100%甲醇-70甲醇-50甲醇-30甲醇-水冲,然后再按照这个顺序反着冲,每个流动相冲半个小时,之后用纯甲醇开始冲洗柱子30分钟;
  4.由于分析样品污染沉积堵塞。对于这种沉积污染的c18柱,用纯水反向冲洗柱子,使用二氯甲烷:甲醇:氨水=96:4:1冲洗效果不错。配置时先用甲醇把氨水溶解了再加二氯甲烷,使用这个流动相要注意其与上个使用和下个使用的流动相是否相容的问题。也可以换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
  5.既无压力指示,又无液体流过的原因:
  (1)泵密封垫圈磨损;更换密封垫圈;
  (2)大量气泡进入泵体。在泵作用的同时,用一个玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
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